普鲁士蓝(亚铁氰化钾)染色实验报告

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一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称

厂家

型号

脱水机

常州市中威电子仪器有限公司

TSJ-SD

包埋机

常州市中威电子仪器有限公司

BMJ-A

病理切片机

赛默飞世尔科技有限公司

SHANDON FINESSE 325

冻台

武汉俊杰电子有限公司

JB-L5

组织摊片机

常州市中威电子仪器有限公司

PHY-III

防脱载玻片

湖北百奥斯生物科技有限公司

BP0510

正置显微镜

奥林巴斯有限公司

CX-31

成像系统

日本滨松光子学株式会社

NanoZoomer®S360

2、主要试剂及货号

名称

厂家

型号

无水乙醇

国药集团化学试剂有限公司

100092683

环保透明剂

同声科技

环保封片剂

同声科技

普鲁士蓝染色试剂盒

湖北百奥斯生物科技有限公司


二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次于环保脱蜡剂(1)、环保脱蜡剂(2)、环保脱蜡剂(3)中分别脱蜡10分钟,然后经无水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇各5分钟。蒸馏水洗3次。

2、将普鲁士蓝染液A和普鲁士蓝染液B等比例混合成普鲁士蓝染液,滴入切片,作用10-20分钟。

3、蒸馏水洗。

4、核固红复染细胞核5-10分钟,稍水洗。

5、常规脱水透明,环保封片剂封片。

6、显微镜下镜检,图像采集分析。


三、结果判读

含铁血黄素呈蓝色,细胞核呈红色。


四、注意事项

1、组织应采用中性福尔马林固定。

2、盐酸用分析纯较好。

3、在整个操作过程中容器要干净,避免使用铁制工具。

4、铁反应前的各个步骤应以蒸馏水冲洗,以防止自来水内的铁离子与组织内的钙盐结合产生假阳性反应。