瑞氏-姬姆萨染色实验报告

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一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称

厂家

型号

防脱载玻片

湖北百奥斯生物科技有限公司

BP0510

高品质盖玻片

湖北百奥斯生物科技有限公司

BP0531

正置显微镜

奥林巴斯有限公司

CX-31

成像系统

日本滨松光子学株式会社

NanoZoomer®S360

2、主要试剂及货号

名称

厂家

型号

环保透明剂

同声科技

瑞氏-姬姆萨染色试剂盒

湖北百奥斯生物科技有限公司


二、实验步骤

1、滴加A液约0.5ml-0.8ml于涂片上,染色1分钟。

2、将B液滴加于A液上(滴加量为A液的2-3倍),以洗耳球吹出微风使液面产生涟漪状,使两液充分混合,染色4-10分钟(血涂片的染色时间可略短,骨髓片的染色时间应视细胞数量多少而定)。

3、水洗(冲洗时不能先倒掉染液,应以流水冲去染液,以防有沉渣沉淀在标本上),干燥,封片。

4、显微镜下镜检,图像采集分析。


三、结果判读

1、血细胞涂片、骨髓涂片染色:红细胞呈粉红色,白细胞浆中颗粒清楚,并显示出各种细胞特有的色彩,细胞核染紫红色,核染色质结构清楚。

2、阴道分泌物(妇科白带)染色:
(1)滴虫:经过染色后的滴虫跟活的滴虫呈现完全不同的形态,一般情况下,看不到鞭毛。经过染色后,滴虫多为梨形、圆形、椭圆形或呈不规则形态,浆被染成灰蓝或天蓝色,核小、枣核状,常偏于一侧,需注意观察,避免与上皮细胞混淆。
(2)念珠菌(霉菌):染成深蓝色,可见芽生孢子,假菌丝细长而直。
(3)白细胞:形态上与血细胞涂片的白细胞相同,一般白细胞的多寡,提示发炎程度的高低,对医师的诊断具有一定的指标作用。
(4)纤毛菌:细长如丝,灰蓝色。
(5)淋菌:蓝色,呈典型的肾形相对,多出现于白细胞、组织细胞内外。需注意女性阴道涂片常出现葡萄球菌,染色结果与淋菌相类似,也是一对一对的以双球菌方式出现,所以对淋菌的判读需十分谨慎,一般情况下,淋菌的发现多会伴随大量白细胞的出现。本染色液对淋菌的判读仅作为初检染色参考结果,不作确诊依据。
(6)加特纳球杆菌:呈蓝色、球杆状。

3、脱落细胞染色:细胞核染紫红色,核仁染蓝色。细胞质随分化程度的不同,其嗜碱性程度也有变化,呈深浅不等的蓝色。


四、注意事项

1、染色时间须视何种标本、涂片厚薄、有核细胞多少、何种细胞及室温等而定;通常染血涂片时滴加B液后染4-5分钟,染骨髓片则应不少于8分钟。气温较低时,可适当延长染色时间。染色结果如出现嗜酸性粒细胞胞浆颗粒着色偏碱,则考虑是否染色时间太长所致。

2、做骨髓涂片时,因为骨髓纤维蛋白含量较高,凝固较快,所以涂片过程要快。骨髓不可用草酸盐抗凝,否则会使血细胞核变形,核染色质致密,胞浆空泡形成,出现草酸盐结晶。

3、染液量需充足,勿使染液蒸发干燥,以防染料沉着于涂片上。

4、做血细胞染色时,当天气寒冷或湿度较大时,应于37℃温箱中保温促干,以免细胞变形缩小或在染色时脱片。

5、本实验应由专业人员操作。