硝酸银(Von-kossa)染色实验报告

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一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称

厂家

型号

脱水机

常州市中威电子仪器有限公司

TSJ-SD

包埋机

常州市中威电子仪器有限公司

BMJ-A

病理切片机

赛默飞世尔科技有限公司

SHANDON FINESSE 325

冻台

武汉俊杰电子有限公司

JB-L5

组织摊片机

常州市中威电子仪器有限公司

PHY-III

防脱载玻片

湖北百奥斯生物科技有限公司

BP0510

正置显微镜

奥林巴斯有限公司

CX-31

成像系统

日本滨松光子学株式会社

NanoZoomer®S360

2、主要试剂及货号

名称

厂家

型号

无水乙醇

国药集团化学试剂有限公司

100092683

环保透明剂

同声科技

环保封片剂

同声科技

硝酸银染色试剂盒

湖北百奥斯生物科技有限公司

BP0320


二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次于环保脱蜡剂(1)、环保脱蜡剂(2)、环保脱蜡剂(3)中分别脱蜡10分钟,然后经无水乙醇、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇各5分钟。蒸馏水洗3次。

2、将切片入1%硝酸银液置于强阳光处作用15-60分钟。

3、蒸馏水洗5分钟。

4、2%硫代硫酸钠液处理2分钟。

5、蒸馏水冲洗5分钟。

6、苏木素染色3-5分钟,蒸馏水稍洗。

7、1%盐酸酒精分化,蒸馏水冲洗10-15分钟。

8、伊红染色10秒。

9、常规脱水透明,环保封片剂封片。

10、显微镜下镜检,图像采集分析。


三、结果判读

钙盐呈褐黑至深黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色。


四、注意事项

1、硝酸银在染色前,切片必须用蒸馏水洗干净。

2、硝酸银液必须是在染色前现配。

3、染色所用的器皿必须用蒸馏水洗干净。

4、硝酸银液的浓度为0.5-5%均可,采用1%的浓度,主要取决于暴光的亮度和时间,若暴露于强阳光下,需时15分钟已足够,若暴露于紫外光灯下,5-10分钟即可。