明胶酶谱检测

服务介绍：

基质金属蛋白酶（MMPs）是高度保守的依赖于锌离子的内切蛋白水解酶家族，是降解细胞外基质蛋白的最重要的一组蛋白水解酶，几乎能降解ECM中的各种蛋白成分。MMPs家族至少已发现与人类有关的20多个成员，其中明胶酶（Gelatinase）包括MMP2、MMP9，又称明胶酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原、弹性纤维和明胶。MMP2相对分子量为72kD，MMP9相对分子量是92kD。

MMPs因为能破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障，在肿瘤侵袭转移中起关键性作用，从而在肿瘤浸润转移中的作用日益受到重视。明胶酶谱实验可以检测MMP2和MMP9的活性，是分子生物学的常用实验技术之一。

主要用途：

明胶酶谱实验可以用于检测MMP2和MMP9的活性。

检测原理：

酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1%明胶）电泳分离，然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性，在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶，最后用考马斯亮蓝将凝胶染色，再脱色，在蓝色背景下可出现白色条带，条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。

服务流程：

1、接收样本。

2、预实验确定样本中蛋白表达。

3、正式实验，5-10个工作日内完成，根据样本类型不同、蛋白表达丰度不同以及检测样本数量多少会相应变化。

4、出具实验报告，提供原始扫描图片。

实验结果：

明胶酶谱图片

样本要求及运输条件：

客户提供细胞样本：

1、前期实验处理细胞状态良好并且采取无血清培养，每个实验组细胞数量保证大于10⁶以上。

2、细胞上清1000rpm离心5分钟后去上清保存于-80℃。

3、培养基中不能含有FBS。