速冻组织OCT包埋实验报告

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一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称

厂家

型号

冰冻切片机

赛默飞世尔科技有限公司

HM525 NX U

超优刀片

湖北百奥斯生物科技有限公司

BP0630

防脱载玻片

湖北百奥斯生物科技有限公司

BP0510

高品质盖玻片

湖北百奥斯生物科技有限公司

BP0531

2、主要试剂及货号

名称

厂家

型号

OCT包埋剂

日本樱花SAKURA


二、实验步骤

1、OCT包埋:新鲜速冻组织不需要固定脱水,根据客户要求将组织修平整用OCT包埋剂包埋后进行切片,速冻组织包埋时用镊子轻轻刮去组织与包埋剂之间的气泡,以免留下空隙导致切片时组织与包埋剂分离;管腔类组织在包埋前要将其在常温下的OCT包埋剂中浸润5-10分钟,目的是让包埋剂填充到管腔里面,避免后期切片时翻片、皱片的情况产生。

2、切片:首先要粗切,粗切一般用40μm左右厚度,将组织粗切快到目的区域时换细切,细切一般厚度在6μm-20μm不等,根据客户开单需求留片,将干净的防脱切片平放于切出的组织片上方可将组织贴于载玻片上,片子于-20℃保存备用。

3、如需固定进行后续染色,将切好的冰切片放于固定液中进行固定10-15分钟,沥干放-20℃保存。

4、如有不能固定的冰切片,片子切完后直接放至-20℃或-80℃保存备用。


三、注意事项

剩余的OCT包埋块组织用包埋剂封住组织切面并于-80℃保存,寄送时用干冰。