基质金属蛋白酶(MMPs)是高度保守的依赖于锌离子的内切蛋白水解酶家族,是降解细胞外基质蛋白的最重要的一组蛋白水解酶,几乎能降解ECM中的各种蛋白成分。MMPs家族至少已发现与人类有关的20多个成员,其中明胶酶(Gelatinase)包括MMP2、MMP9,又称明胶酶A、B,主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原、弹性纤维和明胶。MMP2相对分子量为72kD,MMP9相对分子量是92kD。
MMPs因为能破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障,在肿瘤侵袭转移中起关键性作用,从而在肿瘤浸润转移中的作用日益受到重视。明胶酶谱实验可以检测MMP2和MMP9的活性,是分子生物学的常用实验技术之一。
明胶酶谱实验可以用于检测MMP2和MMP9的活性。
酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。
1、接收样本。
2、预实验确定样本中蛋白表达。
3、正式实验,5-10个工作日内完成,根据样本类型不同、蛋白表达丰度不同以及检测样本数量多少会相应变化。
4、出具实验报告,提供原始扫描图片。
明胶酶谱图片
客户提供细胞样本:
1、前期实验处理细胞状态良好并且采取无血清培养,每个实验组细胞数量保证大于106以上。
2、细胞上清1000rpm离心5分钟后去上清保存于-80℃。
3、培养基中不能含有FBS。
货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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