机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。
1、接收样本,客户提供试剂盒,或者公司提供试剂盒。
2、核对编号,处理样本。
3、预实验检测,正式实验检测。具体检测步骤以说明书为准,5-10个工作日内完成。
4、导出EXCEL数据结果,分析数据。
1、血清:全血标本请于室温放置1-2小时或4℃过夜后于2-8℃ 2000-3000rpm离心15分钟左右。取上清即可立即检测,或进行分装,提取后保存于-80℃,干冰运输。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2000-3000rpm离心20分钟左右,取上清即可立即检测,或进行分装,提取后保存于-80℃,干冰运输。
3、胸腹水、脑脊液、尿液:用无菌管收集。2000-3000rpm离心10分钟左右。取上清,上清保存于-80℃,干冰运输。
4、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,2000-3000rpm离心10分钟左右,取上清,上清保存于-80℃,干冰运输。
5、细胞样本,细胞数量大于5:
贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将细胞悬液1000rpm,离心5min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
悬浮细胞:细胞悬液1000rpm,离心5min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
6、动植物组织样本(干冰运输),组织重量大于50mg:
(1)组织保存完好:保存于-80℃或者液氮。
(2)组织重量要求大于50mg,根据组织大小、检测指标难易、蛋白表达丰度不同以及检测指标数量多少,组织要求数量会相应变化。
(3)组织中血液残留少,应该剔除除目的组织以外的部分。
(4)干冰运输。
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