ELISA检测

服务介绍：

酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，简写ELISA或ELASA）即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。

主要用途：

原则上ELISA可用于检测一切抗原、抗体及半抗原，可以直接定量测定体液中的可溶性抗原。在实际应用中，它和医学、生物化学、免疫学、微生物学、药理学、环境学等方面密切相关。在医学方面，可以用于肿瘤研究中检测甲胎蛋白、检测过敏原、检测血清中白蛋白及免疫球蛋白、传染病诊断中检查乙型肝炎表面抗原等。在环境学方面，可用于测定污染物抗原干预下生长因子、细胞因子、酶的变化。也可用于植物组织浆液中检查植物病毒、普通比色分析等。

检测原理：

ELISA采用抗原与抗体的特异性反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成比例。这种有色产物可用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。

服务流程：

1、接收样本以及ELISA试剂盒，实验室可以有偿提供常备试剂盒或者帮客户代购。

2、预实验确定样本中蛋白表达丰度以及试剂盒的效果。

3、正式实验，约5-10个工作日内完成，根据检测指标数量多少相应变化。

4、出具实验报告，具体检测步骤以说明书为准，数据分析。

实验结果：

ELISA结果

ELISA数据分析

样本要求及运输条件：

1、血清：全血标本请于室温放置1-2小时或4℃过夜后，于2-8℃ 2000-3000rpm离心15分钟左右。取上清即可立即检测，或进行分装，提取后保存于-80℃，干冰运输。

2、血浆：应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2000-3000rpm离心20分钟左右，取上清即可立即检测，或进行分装，提取后保存于-80℃，干冰运输。

3、胸腹水、脑脊液、尿液：用无菌管收集。2000-3000rpm离心10分钟左右。取上清，上清保存于-80℃，干冰运输。

4、细胞培养上清：检测分泌性的成分时，2000-3000rpm离心10分钟左右，取上清，上清保存于-80℃，干冰运输。

5、细胞样本，细胞数量大于100W：

（1）贴壁细胞：将细胞用PBS冲洗2次后，用细胞刮将细胞小心刮下来，将细胞悬液1000rpm离心5分钟。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

（2）悬浮细胞：细胞悬液1000rpm，离心5分钟。弃上清留细胞沉淀，干冰运输。

6、动物组织样本，组织重量大于50mg：

（1）组织保存完好：保存于-80℃或者液氮。

（2）组织重量要求大于50mg，根据组织大小、检测指标难易、蛋白表达丰度不同，以及检测指标数量多少，组织要求数量会相应变化。

（3）组织中血液残留少，应该剔除除目的组织以外的部分。

（4）动物组织样本需干冰运输。