本项目是利用荧光探针DHE(Dihydroethidium)进行活性氧检测,可以用于各种真核培养细胞及组织冰冻切片的检测。在激发波长535nm,发射波长610nm附近,使用荧光显微镜、激发共聚焦显微镜等检测荧光,从而测定细胞内活性氧的水平。
测定组织或培养活细胞内活性氧水平。
二氢乙啶(Dihydroethidium,DHE)可自由透过细胞膜进入细胞内,并被细胞内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)氧化,形成氧化乙啶;氧化乙啶可掺入染色体DNA产生红色荧光。根据或细胞中红色荧光的产生,可以判断细胞ROS含量的多少和变化。
冰冻切片复温-DHE染色-TBST洗涤-封片-显微镜镜检。
小鼠 胎脑 DHE
新鲜冰冻切片-20℃运输送样。
1、DHE在光照和空气中易被氧化,注意避光密封保存。
2、DHE染色结果易淬灭,染色完成后应尽快镜检采图,以减少各种可能的误差。
3、DHE染色必须使用未固定的新鲜组织冰冻切片或活细胞进行染色。
4、荧光探针标记后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针,否则会导致背景较高。
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