用标记的特异性抗体,对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量,进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。组织芯片免疫组化可以将数十至上百个小组织整齐地排列在一张载玻片上进行染色,使芯片上的组织样本实验条件保持一致、节省时间、节省试剂,扫描后便于统一分析。相对单张染色时间和成本都可降低,缺点是选取的组织面积比较小,不能全面的体现个体样本的表达情况。组织芯片免疫组化流程与常规组织免疫组化流程基本一致,但样本比较珍贵,操作流程更加严格。
免疫组织化学技术可借助显微镜的显像与放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、酶、激素、病原体及受体等)。在病理学中,免疫组化技术常用来进行肿瘤的诊断及鉴别诊断,也可通过此技术对肿瘤进行更细化的分类。
根据抗原抗体反应(即抗原抗体特异性结合)和化学显色原理,引入附有标记物的外源性抗体(或抗原),使之锚定于组织或细胞标本中相应的抗原(或抗体),标记物经呈色反应来显示待检抗原(或抗体)。
脱蜡与水化-抗原修复-灭活内源性过氧化物酶和生物素-血清封闭-孵育一抗-孵育二抗-DAB显色-苏木素复染-脱水与透明-封片-显微镜镜检。
1、提供固定合格的样本。组织离体后,选择合适的固定液立即固定,固定液的量建议大于组织体积的10-15倍,新鲜标本用合适的容器固定24-48h,大标本固定12h,再切开固定。标本常温(24℃左右)或冷藏(4℃)固定,切勿冷冻结冰,固定样本常温运输送样。
2、涂片和爬片必须充分固定,石蜡切片实验前需充分脱蜡。
3、提供准确的抗体信息。
1、先做单个样本预实验,可以客户提供,也可以我司准备,按切片数量计费(费用同常规IHC),以便确认抗体特异性以及最佳浓度。
2、抗体效果及浓度确认后,用预实验芯片染色(预实验芯片由客户提供),参考预实验普通切片的条件来进行IHC染色。若客户没有,可以不做。
3、用正式实验芯片染色,预实验芯片确认效果后再做安排。
4、预实验普通切片、预实验芯片和正式实验芯片,最好是同一类型组织,即与客户提供正式实验芯片的组织类型一致。组织芯片建议扫描。
5、正式实验的趋势我司不做保证。
货号 | 名称 | 规格 | 价格 | 操作 |
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BBL-0300 | 免疫组化IHC | 张 | ¥50.00 | 查看详情 |
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