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软骨由软骨组织及其周围的软骨膜组成。软骨膜为致密的结缔组织，对软骨有保护和营养作用。软骨组织由软骨细胞、纤维和基质构成。基质呈均质固态，主要由水和软骨黏蛋白组成。本项目采用甲苯胺蓝染色法对软骨组织进行染色，甲苯胺蓝染色液呈强碱性，更利于组织细胞的着色。
甲苯胺蓝（Toluidine Blue O）是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性的紫红色。
本实验采用甲苯胺蓝作为核心染料对软骨组织进行染色，也可用于肥大细胞的染色。
1、植物组织：木质化细胞壁呈蓝绿色，纤维素细胞壁呈紫蓝色。
2、动物组织：骨组织软骨呈紫蓝色，背景浅蓝色；肠组织肥大细胞呈紫红色，细胞核呈浅蓝色，背景浅蓝色。肥大细胞颗粒呈红紫色，细胞核呈蓝色。
脱蜡至水-甲苯胺蓝染色-冰醋酸分化-水洗-透明封片-显微镜镜检。
1、提供固定合格的样本。组织离体后，选择合适的固定液立即固定，固定液的量建议大于组织体积的10-15倍，新鲜标本用合适的容器固定24-48h，大标本固定12h，再切开固定。标本常温（24℃左右）或冷藏（4℃）固定，切勿冷冻结冰，固定样本常温运输送样。
2、石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。
1、染完后的切片不能长时间放在水里，易褪色。
2、组织一定要完全烤干后再封片，避免组织残留小水珠。
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